Что такое проточная цитометрия?

Posted on
Автор: William Ramirez
Дата создания: 22 Сентябрь 2021
Дата обновления: 12 Ноябрь 2024
Anonim
Проточная цитометрия. FACS. Fluorescence-activated Cell Sorting. Как это работает. Зачем это нужно.
Видео: Проточная цитометрия. FACS. Fluorescence-activated Cell Sorting. Как это работает. Зачем это нужно.

Содержание

Проточная цитометрия - это не тест на определенное заболевание или состояние. Вместо этого проточная цитометрия - это метод, который можно использовать для различных целей. Жидкость, содержащая клетки или бактерии, подается через очень узкую трубку. Это позволяет измерять свойства отдельных клеток с помощью лазеров или других типов света. В медицинских учреждениях его иногда используют для диагностики и лечения рака. Его также можно использовать для проверки состояния здоровья пациента после трансплантации органов. Что делает проточную цитометрию полезным методом, так это то, что ее можно использовать для изучения большого количества клеток, по одной за раз.

Чтобы лучше понять, как работает проточная цитометрия, представьте, что вы хотите узнать количество красных конфет в пакете. Если вы просто посмотрите на сумку, вы можете увидеть, что некоторые конфеты были красными. Однако точную цифру узнать невозможно. Насколько проще было бы, если бы кто-нибудь положил конфеты на конвейер так, чтобы они проходили мимо вас по одной? Тогда вы могли бы просто пересчитать красные конфеты, когда вы их видели. В основном так работает проточная цитометрия. Вместо того, чтобы пытаться найти определенную группу ячеек в растворе, где все они смешаны, они проходят мимо детектора по одной.


Цель теста

Проточная цитометрия используется во многих областях клинических испытаний, потому что это относительно простой способ поиска определенных типов клеток. Эти клетки могут быть раковыми клетками, иммунными клетками или даже разными типами сперматозоидов. Пока есть способ пометить клетки для обнаружения, для их обнаружения можно использовать проточную цитометрию. Обычно все, что нужно для идентификации определенного типа клетки, - это создать моноклональное антитело для распознавания этой клетки. Затем к антителу прикрепляется флуоресцентный краситель, и проточная цитометрия может найти все клетки, на которые нацелено антитело.

Обычно тесты проточной цитометрии включают:

  • Подсчет количества Т-лимфоцитов CD4 в крови человека с ВИЧ. Это помогает определить, насколько здорова их иммунная система, и отследить любой ущерб, причиненный вирусом. Обычно это делается на образце крови.
  • Подсчет количества ретикулоцитов (незрелых эритроцитов) в костном мозге. Это может быть использовано для определения причины анемии. Его также можно использовать для проверки здоровья костного мозга после трансплантации или после химиотерапии. Обычно это делается на образце костного мозга.
  • Тестирование гистосовместимости (HLA) перед трансплантацией органа, независимо от того, предполагается ли кто-то быть донором или реципиентом. Обычно это делается на образце крови.
  • Проверка количества сперматозоидов в образце спермы. Это может быть сделано либо в рамках обследования на бесплодие, либо для того, чтобы узнать, была ли вазэктомия успешной.
  • Диагностика и классификация лейкемии или лимфомы. Для этого может потребоваться образец крови, костного мозга или образец ткани другого типа.
  • Убедитесь, что ваши тромбоциты, часть вашей системы свертывания, работают правильно.

Ваш врач может назначить тест проточной цитометрии по любой из нескольких причин. Конкретный заказанный тест будет зависеть от того, что хочет знать врач. То же самое верно и для образца, на котором будет проводиться тест.


Хотя тесты проточной цитометрии могут быть полезны в различных ситуациях, они не идеальны. Поскольку эти тесты подсчитывают количество ячеек в определенное время, все, что изменяет эти числа, может повлиять на результаты теста. Например, наличие воспаления может изменить количество определенных типов клеток крови в образце, что приведет к ложноотрицательному или ложноположительному результату теста на определенные типы рака. Точно так же недавний сексуальный опыт может сделать анализ спермы неточным, а прием нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) может повлиять на тест функции тромбоцитов.

В зависимости от причины, по которой вы проходите проточную цитометрию, ваш врач может также назначить другие тесты. Например, при диагностике определенных типов рака вашему врачу может потребоваться гистохимия.

Риски и противопоказания

Риски, связанные с проточной цитометрией, ограничивают риски, связанные со сбором образцов. Следовательно, риски зависят от типа используемого образца. Образец крови или спермы относительно легко собрать и безопасно. Напротив, образец костного мозга или ткани сложнее и сопряжен с некоторыми дополнительными рисками. Однако эти тесты по-прежнему считаются вполне безопасными. Значительные синяки, кровотечения, инфекции и / или реакции на анестезию встречаются редко, но они представляют собой наиболее вероятный риск аспирации костного мозга и / или биопсии ткани.


Как правило, врачи не назначают биопсию костного мозга или образец ткани, если не подозревают, что им необходимо проанализировать этот тип образца для диагностики вашего заболевания. Фактически, иногда врачи начинают с проточной цитометрии образца крови, прежде чем перейти к более инвазивным исследованиям. Нет никаких особых противопоказаний к проточной цитометрии, хотя некоторым людям могут потребоваться изменения в протоколах сбора образцов.

Перед тестом

Что произойдет, когда ваш врач решит, что вам нужен тест проточной цитометрии, будет зависеть от причины, по которой он нужен. Иногда вам нужно будет прекратить прием определенного лекарства или какое-то действие на время, прежде чем тест будет точным. Если это так, вас попросят изменить свое поведение и вернуться для взятия пробы позже. В других случаях образец для проточной цитометрии можно взять во время того же визита, когда врач решит, что тест необходим.

Если ваш врач хочет, чтобы вы прошли тест проточной цитометрии, важно спросить, могут ли и как какие-либо лекарства или добавки, которые вы принимаете, повлиять на результаты теста. Вы также должны спросить, какой образец будет взят, и нужно ли вам вернуться для отдельного посещения. Вы также должны сообщить своему врачу, если вы беременны или думаете, что беременны, а также если у вас чувствительность или аллергия на какие-либо лекарства или медицинские предметы (например, латекс).

Время

Время, необходимое для выполнения теста, будет зависеть от того, какой тип образца требуется. Анализ крови должен занять всего несколько минут. Он не будет отличаться от любого другого анализа крови, который вы сдадите в кабинете врача. Ожидается, что образец спермы займет больше времени. Однако продолжительность очень индивидуальна. Это зависит от того, насколько вам комфортно в офисе и сколько времени потребуется для сдачи образца.

Анализы костного мозга займут больше времени. Сколько еще времени будет зависеть от того, нужен ли вам только местный анестетик или нужна внутривенная седация. Если вам просто нужна местная седация, весь процесс займет около получаса. У вас будет 5-10 минут на подготовку, 10 минут на процедуру и 10-15 минут на восстановление. В этот момент вы можете уйти и вернуться к своему дню. Если используется седация внутривенно, вы, вероятно, будете в больнице дольше. Дайте себе час или больше на всякий случай и запланируйте, чтобы кто-нибудь отвез вас домой.

Если вам нужен другой тип биопсии, количество времени будет зависеть от конкретного типа ткани, которую отбирают. Получение образца из печени сильно отличается от взятия образца из лимфатического узла. Поэтому вам следует поговорить со своим врачом о том, как оправдать свои ожидания.

Расположение

Анализы крови, как правило, можно сделать в кабинете врача или в любом центре тестирования. Некоторые врачебные кабинеты также могут сделать биопсию костного мозга на месте. Однако тесты костного мозга и другие биопсии чаще проводятся в больнице или других клиниках. Это потому, что не все врачи держат под рукой анестезию и другие принадлежности. Некоторые виды биопсии могут потребовать посещения хирургического отделения.

Что надеть

Если вы проходите анализ костного мозга или другую биопсию, вам следует ожидать, что для этого вам потребуется переодеться в халат. В зависимости от конкретного типа теста вы можете или не сможете носить определенные предметы одежды. Вас также могут попросить снять украшения, особенно если требуется визуализация.

Для взятия крови вам придется закатать рукав, поэтому надеть рубашку с короткими рукавами или рубашку, которую легко отжимать, - хороший выбор.

Еда и напитки

В общем, перед тестом на проточной цитометрии вы должны быть в состоянии есть и пить как обычно. Однако это может быть неверно, если вам нужно пройти определенные виды седативных препаратов. Если вам делают анализ костного мозга или другую биопсию, посоветуйтесь с врачом, безопасно ли вам есть и пить после полуночи. Кроме того, важно поговорить со своим врачом о том, есть ли какие-либо лекарства, которые вам нужно будет прекратить принимать перед тестом. Ответ будет зависеть от того, какой тип образца используется и для чего проводится тестирование.

Стоимость и страхование здоровья

Проточная цитометрия может быть довольно дорогой. Поэтому некоторые страховщики требуют предварительного разрешения перед проведением этих тестов. Это зависит как от страховщика, так и от указания процедуры. Важно проверить руководящие принципы для вашей конкретной страховой компании, требуется ли предварительное разрешение для того, чтобы пройти тест, который вам нужен.

Что принести

Если вам нужна процедура, всегда полезно иметь при себе карточку медицинского страхования и удостоверение личности с фотографией. Это включает в себя исследование костного мозга или биопсию ткани. Если вам будет введена седация, возможно, вам также придется привести кого-нибудь, чтобы отвезти вас домой. Если вы не уверены, будут ли вам введены седативные препараты, проконсультируйтесь с врачом до дня приема.

Во время теста

Если у вас будет взят образец крови для проточной цитометрии, вы можете общаться только с флеботомистом, медсестрой или техником. Однако, если у вас есть анализ костного мозга или биопсия, по крайней мере, один врач будет присутствовать. Кроме того, там будут и другие члены команды. Количество присутствующих будет зависеть от того, нужна ли вам седация, и от конкретного типа взятой пробы.

Для анализа крови вы просто обнажаете руку, и техник наложит жгут, продезинфицирует участок, вставит иглу, заполнит одну или несколько пробирок кровью, а затем наложит повязку. Для сбора спермы вас направят в отдельную комнату, где вы будете мастурбировать и соберете образец в стерильную чашку.

Предварительный тест

Перед исследованием костного мозга или биопсией вас попросят переодеться в халат. Если вам делают анализ костного мозга или биопсию под местной анестезией, ваша кожа будет очищена, и анестетик будет введен рядом с местом биопсии. Если используется седация внутривенно, в одну из ваших рук будет введено внутривенное введение. Вас попросят лечь в положение, обеспечивающее врачу удобный доступ к месту проведения теста. Если вам неудобно или вы думаете, что вам будет трудно оставаться в этом положении, сообщите об этом врачу. Они могут предоставить вам подушки и опоры, которые помогут вам оставаться на месте. В частности, при исследовании костного мозга важно уметь лежать как можно более неподвижно.

Что такое биопсия костного мозга?

На протяжении всего теста

При проведении анализа костного мозга, как только подействуют анестетики или седативные средства, вам скажут лежать неподвижно. Над тестовым участком можно сделать небольшой надрез (надрез). Затем через кость в костный мозг вводится специальная игла. Это может быть неудобно, и вы можете почувствовать давление. Костный мозг всасывается иглой, что может вызвать чувство тяги. Вторую иглу можно использовать для удаления твердого кусочка костного мозга. Когда образец будет взят, врач будет оказывать давление на это место, пока кровотечение не остановится. Затем на место будет наложена повязка. Затем вас попросят полежать неподвижно 10-15 минут.

Если у вас биопсия из другого места, процедура аналогична. Однако визуализацию можно использовать, чтобы убедиться, что игла входит в нужное место. Например, если они пытаются взять биопсию из новообразования, они могут использовать ультразвук, чтобы направить иглу в нужное место. В определенных обстоятельствах образец, используемый для проточной цитометрии, может потребоваться отобрать под общей анестезией. В этом случае вы будете спать всю процедуру.

Пост-тест

Если после теста вы почувствуете боль или дискомфорт, вам могут посоветовать принять обезболивающее. Ваш врач, скорее всего, посоветует вам связаться с ней, если у вас появится температура после теста или появятся какие-либо признаки воспаления или инфекции в месте, где была взята биопсия. Если вам не требовался анестетик или использовался только местный анестетик, вы сможете вернуться к своему распорядку дня. Если у вас была внутривенная седация или общая анестезия, вы можете расслабиться до конца дня.

После теста

Скорее всего, вашему врачу понадобится несколько дней или больше, чтобы получить результаты вашего теста. Если у вас был анализ крови, в вашем распорядке дня не должно быть никаких изменений. После исследования костного мозга не допускайте намокания повязки или места проведения исследования в течение 24 часов. Это означает, что нельзя купаться, принимать душ или плавать. Вам также скажут не заниматься активной деятельностью в течение дня или двух.

Если вам сделали биопсию в другом месте, лечение будет зависеть от конкретного способа взятия пробы. Возможно, вы сможете быстро вернуться в нормальное состояние. Это также может занять пару дней.

Управление побочными эффектами

Важно связаться с врачом, если после анализа костного мозга или другой биопсии у вас возникнут следующие симптомы:

  • Высокая температура
  • Кровотечение, которое не прекращается или просачивается через повязку
  • Боль, которая со временем усиливается
  • Отек на месте биопсии
  • Покраснение или дренаж в месте биопсии, усиливающиеся со временем.

Если после одной из этих процедур у вас возникла легкая или умеренная боль, обычно ее можно купировать с помощью безрецептурных обезболивающих. Однако, если у вас есть проблемы с кровотечением, вам могут быть рекомендованы не использовать аспирин и некоторые другие лекарства. Поэтому рекомендуется проконсультироваться с врачом о том, какой вариант (например, ацетаминофен) будет лучшим.

Интерпретация результатов

Получение результатов проточной цитометрии может занять до нескольких недель. Как долго будет зависеть от конкретных типов клеток, которые будут искать, а также от того, какая лаборатория используется. Проточная цитометрия - это очень технический тест, и многие лаборатории могут иметь лишь ограниченные возможности для обработки образцов.

Конкретные результаты будут зависеть от причины, по которой проводится тест. Информация о некоторых распространенных типах результатов тестов проточной цитометрии представлена ​​ниже.

  • Иммунофенотипирование - это тип проточной цитометрии, используемый для диагностики лейкемии или лимфомы. Этот тест обычно проводится после того, как в общем анализе крови или дифференциале лейкоцитов обнаруживаются отклонения от нормы. С помощью иммунофенотипирования ваши результаты покажут, присутствуют ли какие-либо аномальные клетки и к какому типу они относятся. Затем ваш врач будет использовать эту информацию в сочетании с информацией о ваших симптомах, чтобы определить, есть ли у вас лейкемия или лимфома. Эта информация также может помочь определить, какой у вас конкретный тип заболевания.
  • Подсчет ретикулоцитов показывает, насколько активно ваш костный мозг вырабатывает эритроциты. Обычно его интерпретируют в сочетании с другими результатами тестов, такими как количество эритроцитов и / или гематокрит. Результаты этого теста не следует интерпретировать сами по себе. И низкие, и высокие значения могут быть нормальными или проблематичными, в зависимости от обстоятельств.
  • Количество CD4 укажите количество клеток CD4 в кубическом миллиметре крови. Нормальное количество CD4 составляет 500-1500. Если у вас число CD4 ниже 500, это означает, что ваша иммунная система может быть подавлена ​​ВИЧ или приемом лекарств, подавляющих вашу иммунную систему. У людей с ВИЧ количество CD4 может меняться со временем, даже если состояние вашего здоровья не изменится. Ваш врач, вероятно, расскажет вам о закономерностях в результатах ваших тестов, вместо того, чтобы смотреть на конкретные результаты. Для людей, принимающих иммунодепрессанты после трансплантации органов, низкий уровень CD4 означает, что эти препараты работают.
  • Результаты тестирования HLA сообщит, совпадают ли донор органов и реципиент, а если нет, сколько у них несовпадений. Низкие значения означают, что трансплантация с большей вероятностью будет успешной, и лучше всего будет спаривание без несоответствий.
  • Анализ спермы Результаты покажут вам, сколько сперматозоидов в образце, а также насколько хорошо они функционируют.

Следовать за

В большинстве случаев, если для диагностики используется проточная цитометрия, она выполняется только один раз. Однако, если для наблюдения за состоянием здоровья используется проточная цитометрия, возможно, вам придется регулярно повторять тест. Например, людям с ВИЧ можно рекомендовать проходить тестирование на CD4 каждые шесть месяцев или даже чаще, в зависимости от того, как они реагируют на лекарства.

Слово от Verywell

В зависимости от того, почему вы проходите тестирование с помощью проточной цитометрии, ожидание результатов может нервировать. Поэтому важно поговорить со своим врачом о том, чего ожидать. Это означает, что нужно спрашивать не только о том, как быстро вы получите результаты, но и о том, какое дополнительное тестирование может потребоваться. Возможно, проточная цитометрия может быть лишь первым шагом к пониманию вашего здоровья или окончательным диагностическим шагом долгого обследования.

Независимо от того, почему вы проходите тестирование на проточной цитометрии, не бойтесь обращаться за поддержкой. Может показаться очевидным, что разговор с кем-то может быть полезным, если вы беспокоитесь о диагнозе рака. Но это может быть одинаково полезно, если вы живете с ВИЧ или даже планируете стать донором органов. Иногда иметь кого-то, с кем можно поделиться своими переживаниями, - лучший способ уберечь их от того, чтобы перегружать вашу жизнь.